リボスイッチを介したAAV Rep/Cap発現制御によるウイルスベクター生産効率の向上
取り組んでいる課題
アデノ随伴ウイルス（AAV）ベクターは、患者の細胞に治療用遺伝子を導入する遺伝子治療用ベクターとして広く利用されるようになっています。しかし、AAVベクターの製造は複雑で、コストが高いという課題があります。AAV製造における大きな課題の一つは、製造過程で遺伝子（DNA）を含まないウイルスの外殻である「空カプシド（空粒子）」が多く生成されることです（図1）。
空カプシドを除去するためには高コストな精製工程が必要となるほか、投与時の炎症反応を増加させる要因にもなります。そのため、フルカプシド（遺伝子を保持した粒子）の収量を向上させながら空カプシドを最小限に抑えることができれば、AAV製造業者と患者の双方に大きなメリットをもたらします。
図1. フルカプシド（遺伝子を保持した粒子）は治療用遺伝子をコードする一本鎖DNAを含むが、空カプシド（空粒子）は含まない。
私たちの解決策
私たちは、「リボスイッチ」を用いてウイルスタンパク質の発現量と発現タイミングを制御することで、空カプシドの問題の解決を目指しています。リボスイッチとは、低分子化合物を添加することで、培養細胞におけるタンパク質の発現を誘導または抑制できる遺伝子スイッチです。
私たちのリボスイッチ技術は、当グループが発見した新しい低分子化合物とRNAアプタマーのペア（図2）に基づいており、優れたスイッチ特性を示します。培養細胞でのAAV生産において、さまざまなウイルス遺伝子の発現を精密に制御することで、ベクター生産の効率と品質を向上できると考えています。
図2. 遺伝子発現を制御するリボスイッチの構築に用いられる低分子化合物（ASP2905）とRNAアプタマー（AC17-4）
